小鼠原代海馬神經(jīng)干原代細胞
商品屬性:
規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 | 貨號 | EY-XY3749 |
種屬來源 | 小鼠 | 組織來源 | 腦 |
生長特性 | 懸浮生長 | 形態(tài)特征 | 神經(jīng)元細胞樣 |
形態(tài):神經(jīng)元細胞樣
培養(yǎng)基:小鼠海馬神經(jīng)干細胞wan全培養(yǎng)基
培養(yǎng)環(huán)境:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
傳代特征:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)
細胞基本屬性:
種屬來源:小鼠
組織來源:腦腦
生長特性:懸浮生長
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:
產(chǎn)品貨期:5-6周左右
運輸方式:T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制:僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹::海馬體主要負責(zé)記憶和學(xué)習(xí),日常生活中的短期記憶都儲存在海馬體中。
干細胞的研究是當(dāng)前生命科學(xué)的熱點,而作為干細胞重要分支的神經(jīng)干胞更以其可自我更新和增殖、分化產(chǎn)生中樞神經(jīng)類神經(jīng)細胞的多分化潛能,在神經(jīng)損傷修復(fù)和退行性疾病治療等方面具有著巨大的應(yīng)用潛勢。神經(jīng)干細胞(neural?。螅簦澹怼。悖澹欤欤螅危樱茫螅┑陌l(fā)現(xiàn),為中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療帶來了新的手段。NSCs是指中樞神經(jīng)系統(tǒng)中具有自我更新、自我增殖及多向分化潛能的一類細胞。研究表明,胚胎、新生及成年哺乳動物的室管膜下區(qū)、海馬、紋狀體、中腦、臭球和脊髓等部位都存在神經(jīng)干細胞。隨著NSCs研究的深入,離體培養(yǎng)的NSCs已經(jīng)成為常用的一種的基礎(chǔ)工具。
細胞培養(yǎng)操作:
收貨處理取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)
傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)
傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法:
1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4.待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
原代細胞培養(yǎng)的主要步驟包括:
?一、剝離組織,去除外膜、結(jié)締組織等?:將組織從動物體中取出,并去除可能存在的外膜或結(jié)締組織等雜質(zhì)。
二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?:使用生理鹽水或其他適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌組織,然后將其剪成約1mm大小的小塊。
三、?用0.1%~0.2%的消化?:將剪碎的組織塊加入含有0.1%~0.2%的緩沖液中,進行消化。消化時間可根據(jù)具體實驗需求選擇熱消化(37℃)或冷消化(4℃),熱消化時間短,冷消化時間長但條件更溫和。
?四、吹打分散后,過濾、計數(shù)?:將消化后的細胞吹打到一個離心管中,然后過濾、計數(shù)。
五、?按30萬/毫升分瓶培養(yǎng)?:將計數(shù)后的細胞按30萬/毫升的濃度分瓶培養(yǎng)。
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